DIN EN ISO 9936:2016
Жиры и масла животные и растительные. Определение содержания токоферола и токотриенола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ISO 9936:2016); Немецкая версия EN ISO 9936:2016.

Стандартный №: DIN EN ISO 9936:2016
Дата публикации: 2016
Разместил: German Institute for Standardization
состояние: быть заменен
быть заменен: DIN EN ISO 9936:2016-11
Последняя версия: DIN EN ISO 9936:2016-11
заменять: DIN EN ISO 9936:2011

сфера применения

Обзор стандарта и технологическое развитие

DIN EN ISO 9936:2016 — международный стандарт, опубликованный Немецким институтом стандартизации для определения токоферолов и токотриенолов в животных и растительных жирах и маслах. Этот стандарт полностью заменяет версию 2011 года и использует высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) в качестве основного технического подхода, предоставляя авторитетный аналитический метод контроля качества масложировой продукции.

Область применения и ограничения

Настоящий стандарт применим для определения свободных α-, β-, γ- и δ-токоферолов и токотриенолов (совместно именуемых соединениями токоферола) в животных и растительных жирах и маслах. Особенно важно отметить, что молоко и молочные продукты (или жиры, извлеченные из них) явно исключены из сферы применения. Продукты, содержащие токоферолы или эфиры токотриенолов, требуют предварительного омыления.

Тип образца	Требования к обработке	Примечания
Свободные токоферолы в маслах и жирах	Определение прямого растворения	Используйте н-гептан для растворения
Этерифицированные токоферолы	Требуется предварительное омыление	Метод холодного омыления приведен в Приложении B
Молоко и молочные продукты	Не применимо к настоящему стандарту	Требуются другие специальные методы

Принцип метода и прибор Требования

Этот метод основан на разделении на основе высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием колонки с нормальной фазой и детектированием с использованием флуоресцентного детектора (длина волны возбуждения: 295 нм, длина волны испускания: 330 нм). Если флуоресцентный детектор недоступен, можно использовать УФ-детектор (292 нм), однако это не рекомендуется.

Основные требования к прибору: Высокоэффективная жидкостная хроматография, оснащенная флуоресцентным детектором. Рекомендуется использовать колонку с силикагелем на основе диола (250 мм × 4 мм или 250 мм × 4,6 мм, размер частиц 5 мкм). Для образцов, содержащих β-токотриенол, колонка с диолом предпочтительнее колонки с силикагелем, поскольку колонки с силикагелем не могут разделить γ-токоферол и β-токотриенол.

Подготовка и калибровка образца

Подготовку образца следует проводить в темноте. Взвесьте (0,25±0,1) г образца в мерную колбу объемом 25 мл и доведите до объема н-гептаном. Если раствор непрозрачен, профильтруйте его через нейлоновую мембрану с размером пор 0,45 мкм.

Для калибровки используется метод внешнего стандарта с использованием исходных растворов различных стандартов токоферола. Чистота стандарта должна быть подтверждена методом УФ-спектроскопии (см. Таблицу 1 для коэффициентов поглощения). Диапазон концентраций обычно составляет 1-5 мкг/мл. Стандартный раствор следует готовить ежедневно и хранить в темном месте. 0,0087

Оптимизация хроматографических условий

В качестве подвижной фазы был рекомендован раствор тетрагидрофурана с концентрацией 3,85% (объёмная доля) в н-гептане. Необходимо соблюдать хроматографические условия: время удерживания α-токоферола 8–12 минут, степень разделения β- и γ-токоферолов ≥ 1,0. В качестве других подходящих систем подвижной фазы можно использовать различные комбинации, например, метил-трет-бутиловый эфир/н-гептан (5:95).

Относительные контрольные значения времени удерживания (при α-токофероле = 1,00):

β-токоферол: 1,34 (колонка с силикагелем) / 1,59 (колонка с диолом)
γ-токоферол: 1,63/1,74
δ-токоферол: 2,24/2,46
α-токотриенол: 1,19/1,24

Данные о точности и статистическая проверка

Данные международных испытаний по оценке воздействия на окружающую среду 2003 года показали, что метод обладает отличной повторяемостью и воспроизводимостью. Участвовали 12 лабораторий, которые протестировали 8 различных образцов масла, и статистические результаты подтвердили надежность метода.

Аналайт	Диапазон концентраций (мг/кг)	Предел повторяемости (r)	Предел воспроизводимости (R)
α-Токоферол	106-2215	0,0718-0,0900×среднее	0,2094-0,2557×среднее
β-Токоферол	0,01% ... 7-841	0,016-0,037× среднее	0,128-0,156× среднее
Общие токоферолы	211-3249	0,027-0,042× среднее	0,033-0,098× среднее

Предыстория и значение разработки стандарта

Настоящий стандарт был совместно разработан Техническим комитетом по пищевым продуктам ISO/TC34 и Техническим комитетом по маслам, животным и растительным жирам и маслам CEN/TC307 и отражает последние разработки в области международных аналитических технологий. Третье издание включает версию стандарта 2006 года и ее поправки, с всесторонними обновлениями технического содержания, обеспечивая унифицированный стандарт аналитического метода для мировой масложировой промышленности.

Применение этого метода имеет большое значение для оценки пищевой ценности пищевых масел, мониторинга уровня сохранения витамина Е в процессе обработки и контроля качества продукции. Это один из основных стандартных методов для лабораторий анализа пищевых продуктов.

DIN EN ISO 9936:2016 Ссылочный документ

DIN EN ISO 5555:2014 Животные и растительные жиры и масла. Отбор проб (ISO 5555:2001 + Дополнение 1:2014); Немецкая версия EN ISO 5555:2001 + A1:2014.
DIN EN ISO 661:2005 Животные и растительные жиры и масла. Подготовка испытательного образца (ISO 661:2003); Английская версия DIN EN ISO 661:2005.
DIN ISO 3696:1991 Вода для аналитических лабораторных целей; спецификации и методы испытаний; идентично ISO 3696:1987
DIN ISO 5725-1:1997 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Общие принципы и определения (ISO 5725-1:1994).
DIN ISO 5725-2:2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерения (ISO 5725-2:1994, включая техническое исправление 1:2002).
ISO 3696:1987 Вода для аналитических лабораторных целей; Спецификация и методы испытаний
ISO 5555:2001 Животные и растительные жиры и масла - Отбор проб
ISO 5725-1:1994 Точность (правдивость и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Общие принципы и определения.
ISO 5725-2:1994 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений.
ISO 661:2003 Животные и растительные жиры и масла. Подготовка испытательной пробы

DIN EN ISO 9936:2016 История

2016 DIN EN ISO 9936:2016-11 Животные и растительные жиры и масла. Определение содержания токоферола и токотриенола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ISO 9936:2016)
2016 DIN EN ISO 9936:2016 Жиры и масла животные и растительные. Определение содержания токоферола и токотриенола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ISO 9936:2016); Немецкая версия EN ISO 9936:2016.
2011 DIN EN ISO 9936:2011 Животные и растительные жиры и масла. Определение содержания токоферола и токотриенола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ISO 9936:2006 + Поправка 1:2011); Немецкая версия EN ISO 9936:2006 + A1:2011.
2006 DIN EN ISO 9936:2006 Животные и растительные жиры и масла. Определение содержания токоферола и токотриенола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ISO 9936:2006)

Жиры и масла животные и растительные. Определение содержания токоферола и токотриенола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ISO 9936:2016); Немецкая версия EN ISO 9936:2016.

стандарты и спецификации