ASTM F3106-14
Стандартное руководство по анализам дифференцировки остеобластов in vitro
- Стандартный №
- ASTM F3106-14
- Дата публикации
- 2014
- Разместил
- American Society for Testing and Materials (ASTM)
- состояние
- быть заменен
- ASTM F3106-22
- Последняя версия
- ASTM F3106-22
- сфера применения
- 4.1 В этом руководящем документе описаны компоненты и условия, используемые для анализов дифференцировки остеобластов in vitro, которые можно использовать для скрининга остеогенной способности стволовых клеток-предшественников из различных источников человека или животных, включая соединительную ткань смешанного тканевого происхождения. популяции-предшественники или популяции клеток, которые можно селективно изолировать или манипулировать посредством размножения культуры, обработки, трансфекции или генетической модификации. 4.2. Анализ дифференцировки остеобластов можно назвать анализом остеогенеза или анализом минерализации. 4.3. Важно тщательно выбирать компоненты и условия, используемые для анализов дифференцировки остеобластов in vitro, поскольку высокие количества компонентов остеогенной среды могут привести к дистрофическим, патологическим или артефактным преципитатам на основе кальция, которые не указывают на дифференцировку остеобластов. клеток в культуре до функциональных остеобластов (1).3 Например, когда в среде используются высокие концентрации бета-глицерофосфата, который действует в качестве субстрата для фермента щелочной фосфатазы, секретируемого клетками, наблюдается заметное увеличение количества свободного фосфата, который затем осаждается ионами Ca++ в среде с образованием кристаллов фосфата кальция независимо от статуса дифференцировки клетки-предшественника (2, 3). 4.4. Продукция щелочной фосфатазы является ранним событием, связанным с дифференцировкой остеобластов, но ее также можно стимулировать в других типах клеток путем добавления в среду остеогенной добавки дексаметазона. Щелочная фосфатаза усиливает образование кальцинированных отложений до их естественного появления в кости, что обычно совпадает с экспрессией костного сиалопротеина и остеокальцина остеобластами, продуцирующими минерализованный матрикс. Таким образом, эти виды кальцинированных/минеральных отложений считаются дистрофическими, патологическими или артефактными, поскольку они не были инициированы зрелым остеобластом. Измерение кальция, подобное описанному в Методике F2997 для количественной оценки отложений кальция в остеогенной культуре клеток-предшественников с использованием анализа флуоресцентных изображений, может, таким образом, привести к потенциально ложной интерпретации статуса дифференцировки остеопрогениторных клеток, если оно используется изолированно без гена или данные об экспрессии белка. 4.5. Помимо скрининга мультипотентности недифференцированных стволовых клеток, анализы дифференцировки остеобластов полезны для оценки остеоиндуктивности субстратов клеточных культур, каркасов из биоматериалов, лекарств или биомолекул; такие как цитокины или факторы роста. 4.6. Анализы дифференцировки остеобластов in vitro не позволяют предсказать формирование кости in vivo, но полезны для целей сравнения со стандартами...
ASTM F3106-14 Ссылочный документ
- ASTM F2312 Стандартная терминология, относящаяся к медицинским продуктам тканевой инженерии
- ASTM F2997 Стандартная практика количественного определения отложений кальция в остеогенной культуре клеток-предшественников с использованием анализа флуоресцентных изображений*， 2023-11-02 Обновление
ASTM F3106-14 История
- 2022 ASTM F3106-22 Стандартное руководство по анализам дифференцировки остеобластов in vitro
- 2014 ASTM F3106-14 Стандартное руководство по анализам дифференцировки остеобластов in vitro
