ISO 20836:2021
Микробиология пищевой цепи. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для обнаружения микроорганизмов. Испытание термических характеристик термоциклеров.
- Стандартный №
- ISO 20836:2021
- Дата публикации
- 2021
- Разместил
- International Organization for Standardization (ISO)
- Последняя версия
- ISO 20836:2021
- сфера применения
-
Интерпретация основного содержания стандарта
Как важная часть серии стандартов по обнаружению микроорганизмов в пищевой цепи с помощью ПЦР, стандарт ISO 20836:2021 впервые включает в область своего применения приборы для количественной ПЦР с флуоресценцией в реальном времени, заменяя документ технической спецификации 2005 года. Стандарт выделяет следующие технологические инновации:
Технические параметры ISO/TS 20836:2005 ISO 20836:2021 Область применения Только стандартный прибор для ПЦР Включает прибор для количественной ПЦР с флуоресценцией в реальном времени Методы испытаний Биохимические и физические методы сосуществуют Фокус на физических методах испытаний Метрологическая прослеживаемость Отсутствует четкая требования Соответствует требованиям ISO/IEC 17025 Тестирование на соответствие Не рассматривается Новый полный процесс тестирования
Анализ ключевых терминов
Однородность температуры (Tравномерность): Отражает распределение температуры внутри реакционного модуля, рассчитываемое как Tмакс - Tмин. Стандарт требует, чтобы по крайней мере 12,5% лунок (≥12 лунок) модулей с менее чем 96 лунками были измерены для обеспечения репрезентативности данных.
Характеристики температурного перехода: включают динамические параметры, такие как скорость нагрева (Vt) и выброс температуры (Tovs,avg). Например, прибор ABI 7500 определённой марки зафиксировал максимальный выброс 2,3 °C при 95 °C, длившийся 8 секунд.
Ключевые моменты для реализации теста производительности
- Схема расположения датчика:
- Прямоугольный модуль должен включать четыре угла и центральное положение (как показано на рисунке A.1)
- Независимые реакционные камеры должны быть испытаны по одной
- Протокол температуры:
- Должен включать тестирование во всем диапазоне 30–95 ℃
- Время удержания каждой температуры ≥30 секунд
- Рекомендуется использовать общий протокол из Приложения B
- Сбор данных:
- Частота дискретизации ≥1 Гц (для высокоскоростных моделей требуется ≥4 Гц)
- Время отклика датчика ≤1 секунды
Метод проверки соответствия
Стандарт предусматривает трехуровневые пути проверки:
Методы проверки Ключевые моменты для внедрения Применимые сценарии Сравнение спецификаций производителей Учет неопределенности измерений (k=2) Принятие нового оборудования Валидация метода ПЦР Градиентная ПЦР для определения диапазона допустимых температур Этап разработки метода Функциональный Тестирование Размещение слабых положительных контролей в лунках с экстремальными температурами При отсутствии четких спецификаций
Рекомендации по внедрению стандарта
Характеристики работы лаборатории:
- Составьте план регулярного технического обслуживания (рекомендуется проводить проверку работоспособности каждые 6 месяцев)
- Поддерживайте температуру окружающей среды 23±2°C и влажность <60% отн. влажн.
- При использовании такого оборудования, как Eppendorf Mastercycler
Перспективы развития технологий: В настоящее время не существует прослеживаемого метода калибровки для оптических блоков детектирования. В будущем необходимо разработать решение для оптической калибровки, соответствующее стандарту ISO/IEC 17025.
- Схема расположения датчика:
ISO 20836:2021 Ссылочный документ
- ISO/IEC Guide 98-3:2008 Неопределенность измерения. Часть 3. Руководство по выражению неопределенности измерения (GUM:1995).
ISO 20836:2021 История
- 2021 ISO 20836:2021 Микробиология пищевой цепи. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для обнаружения микроорганизмов. Испытание термических характеристик термоциклеров.
