Анализ основного содержания стандарта
ISO 16266-2:2018 определяет метод MPN для обнаружения Pseudomonas aeruginosa в воде с использованием среды Pseudalert и системы Quanti-Tray. Этот метод основан на гидролизе субстрата 7-амино-4-метилкумаринаминопептидазой и обеспечивает подтверждающее обнаружение в течение 24–28 часов с помощью реакции УФ-флуоресценции.
Сравнение основных процессов обнаружения
| Этапы обнаружения | Образец 100 мл | Образец 250 мл |
| Обработка образца | Непосредственно добавьте 2,45 г питательной среды | Аликвоту в 2×100 мл + 1×50 мл (доведите до 100 мл водой) |
| Контейнер для культуры | 51-луночный или 97-луночный лоток Quanti-Tray | 3 51-луночных лотка Quanti-Tray |
| Расчет MPN | См. таблицу B.1/B.2 | Рассчитайте по формуле B.4 |
| Предел обнаружения | 1-2419 MPN/100 мл | 0,4-200 MPN/250 мл |
Подробное объяснение технических моментов
1. Характеристики питательной среды
Псевдоалертная питательная среда содержит: аминокислоты, витамины, антибиотики и другие ингредиенты. Его основные характеристики включают в себя:
- Условия хранения: 2-30 ℃ в защищенном от света месте, годен в течение 12 месяцев
- Положительная реакция: синяя флуоресценция под УФ-светом 365 нм
- Антиинтерференционная защита: может выдерживать высокие концентрации гетеротрофных бактерий
2. Требования к контролю качества
Лаборатория должна выполнять следующее:
- Проверка характеристик питательной среды (см. ISO 11133)
- Каждая партия испытаний должна включать положительный контроль (P. aeruginosa WDCM 00024)
- Регулярная калибровка УФ-лампы (≤6000 часов или ежегодная замена)
Рекомендации по внедрению стандарта
1. Специальная обработка проб воды
Для неподходящих проб воды, таких как газированная вода для напитков и морская вода, необходимо выполнить следующее:
- Проверка пригодности метода
- Предынкубационная обработка (для устранения влияния CO₂)
- Разбавление для снижения ионной силы
2. Спецификации представления данных
Отчет об испытании должен включать:
- Условия и время хранения образца (например, хранение при температуре 5±3°C)
- Используемая модель Quanti-Tray (51/97-луночный)
- Описание градуировки интенсивности флуоресценции
Предыстория развития стандарта
Этот стандарт заменяет традиционный метод мембранной фильтрации, и его технические преимущества отражены в:
- Время обнаружения: сокращено с 5 дней до 24 часов
- Степень автоматизации: запайщик планшетов Quanti-Tray снижает человеческий фактор
- Специфичность: реакция ферментного субстрата позволяет избежать ложноположительных результатов