ISO 18465:2017
Микробиология пищевой цепи. Количественное определение рвотного токсина (цереулида) с использованием ЖХ-МС/МС.

Стандартный №

ISO 18465:2017

Дата публикации

2017

Разместил

International Organization for Standardization (ISO)

Последняя версия

ISO 18465:2017

сфера применения

Стандартный технический анализ

ISO 18465:2017 — первый международный стандартный метод количественного определения фумонизина в пищевых продуктах. Этот токсин, продуцируемый специфическим видом Bacillus cereus, чрезвычайно термостабилен и кислотоустойчив.

---

Принцип и инновационность метода

Благодаря использованию технологии жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) достигается точная количественная оценка с помощью следующих ключевых этапов:

Технические аспекты	Конфигурация ВЭЖХ	Конфигурация УВЭЖХ	Инновационные преимущества
Хроматографическая колонка	C18 (100×2,1 мм, 5 мкм)	BEH C18 (50-100×2,1 мм, 1,7 мкм)	Время анализа сокращено на 40%
Подвижная фаза		Повышенная эффективность ионизации
Параметры масс-спектрометра	Режим положительных ионов ESI, мониторинг MRM		10-кратное увеличение специфичности

---

Ключевые рабочие моменты

Подготовка образца: Использовалась экстракция встряхиванием ацетонитрила, и для коррекции эффектов матрицы был добавлен внутренний стандарт, меченый 13C6. Для образцов с высоким содержанием жира рекомендуется этап обезжиривания н-гептаном.

Масс-спектрометрический мониторинг: Для количественного определения и подтверждения были выбраны две пары характерных ионных пар (m/z 1170,7→314,4 и 1170,7→499,4). Отклонение ионного соотношения должно контролироваться в пределах ±20%.

---

Показатели эффективности метода

Данные о производительности для основных пищевых матриц, проверенные 11 лабораториями:

Пищевая матрица	Добавленный уровень (мкг/кг)	ОСР повторяемости (%)	ОСР воспроизводимости (%)	Извлечение (%)
Рис	4,9-73,7	3,4-4,6	4,3-12,8	96,5-99,3
Сливки Выпечка	4,8-71,7	4,1-13,4	4,3-20,2	96,7-97,7
Детская смесь	4,8-72,7	4,8-13,4	6,6-18,4	98,1

---

Рекомендации по внедрению

1. Лаборатории должны регулярно проверять параметры настройки масс-спектрометра, чтобы гарантировать отклонение оси масс <0,1 Да
2. Для крахмалистых продуктов (таких как рис и макаронные изделия) специальные следует уделять внимание степени гомогенизации во время предварительной обработки
3. Рекомендуется вставлять образец контроля качества через каждые 10 образцов для мониторинга затухания сигнала <10%
4. Когда значение теста приближается к LOQ (0,6 мкг/кг), его следует подтвердить вторичной фрагментацией масс-спектрометрии

---

Стандартный эволюционный анализ

По сравнению с более ранними биоанализами (такими как тесты на подвижность сперматозоидов), этот стандарт имеет три основных прорыва:

• Специфичность: может различать 18 гомологов фумонизина
• Чувствительность: LOD достигает 0,2 мкг/кг, что в 100 раз лучше
• Производительность: время анализа одного образца <15 минут

В будущем может быть включена новая технология UHPLC-TOFMS, чтобы справиться с постоянно обнаруживаемые варианты токсина (изоцереулиды AG).