SN/T 5334.2-2020
Цифровые методы ПЦР-обнаружения генетически модифицированных растительных продуктов. Часть 2: Генетически модифицированные соевые бобы. (Англоязычная версия)

Стандартный №

SN/T 5334.2-2020

язык

Китайский, Доступно на английском

Дата публикации

2020

Разместил

Professional Standard - Commodity Inspection

Последняя версия

SN/T 5334.2-2020

сфера применения

Анализ стандартной технической структуры

Основные элементы	Требования SN/T 5334.2	Сравнение с обычной ПЦР
Технология детекции	Цифровая капельная ПЦР	Количественная флуоресцентная ПЦР в реальном времени
Объекты детекции	FG72 и другие 13 генетически модифицированных штаммов	Обычно детекция одного штамма
Предел количественного определения	1,0–3,0 копий/мкл	10–100 копий/мкл

---

Ключевые технологические инновации

В стандарте принята стратегия двойной маркировки зондов (FAM/BHQ1 и TAMRA), которая решается с помощью дизайна трансграничной последовательности:

• 3'-концевое специфическое обнаружение штамма DAS68416-4
• 5'-концевое зацепление штамма MON87708

Параметры циклирования задаются по-разному в зависимости от содержания ГХ. Например, для штамма CV127 требуется время денатурации 30 с.

---

Руководство по внедрению и применению

Типичный процесс обнаружения

1. Подготовка образца: Измельчение семян сои до размера частиц ≤0,5 мм
2. Выделение ДНК: Метод CTAB, требования к чистоте: A260/280=1,8-2,0
3. Реакционная система: 60 нг ДНК-матрицы + 2×ddPCR Super Mix
4. Программа термоциклирования: Денатурация при 94 ℃ в течение 15-30 с, отжиг при 60 ℃ в течение 44-49 циклов

Ключевые точки контроля качества

• Отрицательный контроль: ДНК сои без ГМО
• Положительный контроль: Стандартные вещества различных штаммов (ERM-AD413 и т. д.)
• Бланк-контроль: Сверхчистая вода вместо матрицы

---

Предыстория эволюции стандарта

С началом коммерческого выращивания в Бразилии в 2019 году новых сортов сои, устойчивых к насекомым, таких как DAS-81419-2, традиционные методы ПЦР в реальном времени продемонстрировали ограничения в:

• Обнаружении нескольких целей
• Количественной оценке образца низкого уровня
• Устойчивости к помехам от сложных матриц

, что побудило к разработке данного стандарта.

SN/T 5334.2-2020 Ссылочный документ

• SN/T 5334.1 Метод цифровой ПЦР-детекции генетически модифицированной растительной продукции. Часть 1. Общие требования и определения.

SN/T 5334.2-2020 История

• 2020 SN/T 5334.2-2020 Цифровые методы ПЦР-обнаружения генетически модифицированных растительных продуктов. Часть 2: Генетически модифицированные соевые бобы.

Специальные темы по стандартам и нормам

стандарты и спецификации