SC/T 7227-2017
Метод изотермической амплификации, опосредованной петлей транскрипции (RT-LAMP), для обнаружения вируса инфекционного гематопоэтического некроза (Англоязычная версия)

Стандартный №

SC/T 7227-2017

язык

Китайский, Доступно на английском

Дата публикации

2017

Разместил

Professional Standard - Aquaculture

Последняя версия

SC/T 7227-2017

сфера применения

Интерпретация основного содержания технического стандарта

Настоящий стандарт определяет полный протокол для обнаружения вируса инфекционного гемопоэтического некроза (IHNV) с использованием технологии изотермической амплификации с обратной транскрипцией и петлей (RT-LAMP), включая:

Технические элементы	Традиционная ПЦР	RT-LAMP
Время обнаружения	2-3 часа	30-60 минут
Требования к оборудованию	Прибор для ПЦР	Вода постоянной температуры bath
Чувствительность	103 Прямой внешний праймер (F3): 5'-GCAATTCTCCTCCAGAGC-3' Обратный петлевой праймер (LoopB): 5'-CCTTGCCTGGATCAAGATCA-3' Оптимизация системы реакции Стандартная система реакции объемом 25 мкл содержит: 8 ммоль/л MgSO4 0,8 моль/л бетаина 0,32 ед./мкл Анализ точек реализации Спецификации обработки образцов Для рыб применяются различные стратегии отбора проб разные размеры: Мальки: отбор проб всей рыбы (желточный мешок удалить) Взрослые рыбы: предпочтительно отбирать ткани мозга, почек и селезенки Требования к контролю качества В ходе эксперимента необходимо установить три уровня контроля: Бланк-контроль: вода DEPC Отрицательный контроль: ткань, отрицательная по IHNV Положительный контроль: культура стандартного штамма Прикладное значение стандарта По сравнению с традиционной ПЦР этот метод имеет преимущества простоты эксплуатации и низких требований к оборудованию и особенно подходит для: Низовых станций распространения водных технологий Тестирования на месте для карантина при въезде-выезде Фермерских болезней мониторинг Техническая информация о разработке Технология RT-LAMP использует реакцию замещения цепи ДНК ДНК-полимеразы Bst для достижения амплификации при постоянной температуре 65 °C, устраняя необходимость в оборудовании для циклического изменения температуры. Версия стандарта 2017 года значительно оптимизирует дизайн праймеров и методы проявления цвета по сравнению с предыдущими версиями. SC/T 7227-2017 Ссылочный документ GB 19489  Лаборатории. Общие требования биобезопасности. GB/T 6682  Вода для аналитических лабораторий. Спецификация и методы испытаний. SC/T 7103 Протоколы отбора проб для карантина водных животных на производственной территории SC/T 7227-2017 История 2017 SC/T 7227-2017 Метод изотермической амплификации, опосредованной петлей транскрипции (RT-LAMP), для обнаружения вируса инфекционного гематопоэтического некроза Специальные темы по стандартам и нормам Обнаружение усиления вирусный транскрипционный вектор Национальный метод кольцевой изотермической амплификации обнаружение после амплификации Метод лентивирусной трансфекции вирус инфекционного некроза кроветворения Технология транскрипционной амплификации кроветворный орган кроветворный орган вирус некроза кроветворения инфекционный гематопоэтический некроз стандарты и спецификации AWWA WQTC56953 Обнаружение инфекционного аденовируса с помощью мРНК ОТ-ПЦР в клеточной культуре AWWA WQTC62553 Персистенция норовируса и вирусных суррогатов, посеянных в поверхностные и подземные воды © 2025. Все права защищены.