Введение В ряде исследований (обзор Dean@, 1985) было показано, что профессиональное воздействие бензола увеличивает частоту хромосомных повреждений лимфоцитов периферической крови. Было также показано, что воздействие бензола in vivo индуцирует хромосомные аберрации (CA)@ микроядра (MN)@ и обмены сестринских хроматид (SCE) в клетках костного мозга ряда видов животных (например, хомяков@ мышей@ крыс). ) в зависимости от различных путей воздействия (ингаляция, пероральный зонд, подкожный, внутрибрюшинный) и концентраций (Дин, 1985). Большинство этих исследований включало острое воздействие бензола в относительно высоких дозах, как правило, не имеющее отношения к ситуациям профессионального воздействия на человека. Только три цитогенетических исследования костного мозга (Kissling and Speck@ 1971; Cortina et al.@ 1982; NTP@ 1985) имели продолжительность воздействия более двух недель@ и@ из этих трех исследований@ только одно (Cortina et al.@ 1982) включало воздействие на животных бензола при вдыхании, путь, наиболее подходящий для профессиональных условий. На основе исследований острого воздействия@ можно сделать несколько выводов о генотоксичности бензола@ для костного мозга, измеренной по индукции CAs@ MN и/или SCEs@. Первые самцы животных (мыши и крысы) демонстрируют более высокий уровень генотоксического повреждения, чем самки животных (Dean@ 1969; Meyne and Legator@ 1980; Tice et al.@ 1980; Siou et al.@ 1981; Tice et al.@ 1982; Гад-Эль-Карим и др.@ 1984; NTP@ 1985). Во-вторых, величина реакции зависит от напряжения и возраста (Tice et al., 1982; Luke et al., 1985). В-третьих, индукция повреждения зависит от метаболизма бензола до реактивных частиц (Tice et al., 1982; Gad-El-Karim et al., 1984). В-четвертых, острое воздействие относительно низких доз бензола (1-30 частей на миллион) в течение короткой продолжительности (от 4 часов до 2 дней) может вызвать значительное увеличение SCE и MN у животных (Tice et al. @ 1982; Toft et al. @). 1982; Тайс и др., 1984; Эрекссон и др., 1983). . Наконец, мыши оказались более чувствительными, чем крысы (Cortina et al., 1982). Что не было исследовано экспериментально недостаточно подробно, так это зависящий от времени эффект условий хронического воздействия (т.е. более 1 месяца) на индукцию узкого генотоксического повреждения костей. Обычно в экспериментах, включающих условия хронического воздействия, оценивали повреждение костного мозга только по окончании продолжительности воздействия (например, Cortina et al., 1982) и не оценивали, изменялась ли величина генотоксического ответа в течение периода воздействия. Недавно МакГрегор и его коллеги (MacGregor et al., 1980; Schlegal and MacGregor, 1982) представили вариант микроядерного теста эритроцитов, разработанный Шмидом (1976), который позволяет проводить зависимую от времени оценку генотоксического повреждения костного мозга у мышей, вызванного во время хронические воздействия. Микроядра представляют собой цитоплазматические ядерные тельца, образующиеся в результате исключения ацентрических хромосомных фрагментов или отстающих хромосом из дочерних ядер во время цитокинеза (Schmid@ 1976; Heddle et al.@ 1983) (рис. I)@ Из-за скорости и простоты оценки ООН@ MN анализ часто используется как чувствительная, но менее трудоемкая альтернатива классическому метафазному анализу (Heddle et al., 1983). Хотя было введено несколько форм оценки MN, наиболее развитая форма оценки MN включает оценку MN и полихроматических эритроцитов костного мозга (PCE) (обзор Heddle et al., 1983). Продукт недавнего клеточного деления@ эти безъядерные клетки полностью дифференцированы@ в большом количестве@ и легко распознаются. Кроме того, эти клетки имеют время пребывания в костном мозге около 24 часов, предоставляя информацию о недавнем повреждении костного мозга. Анализ MN периферической крови мышей, представленный МакГрегором и его коллегами, обеспечивает повышенную простоту и чувствительность, избегая при этом ограничений, связанных с анализом MN костного мозга. Анализ МакГрегора основан на оценке MN в PCE и в нормохроматических эритроцитах (NCE) периферической крови видов животных, у которых селезенка не удаляет микроядерные эритроциты из системы кровообращения [например, мышь@ сирийский золотой хомяк (MacGregor et al.@) 1980; Schlegal and MacGregor@ 1982; Tice et al.@ 198435- Анализ частоты MN в клетках периферической крови позволяет многократно брать образцы от одного и того же животного в условиях хронического воздействия и устанавливать как недавние, так и прошлые повреждения костного мозга. Это последнее преимущество основано на том факте, что время жизни PCE в периферической крови составляет 1*-2 дня и, таким образом, может указывать на повреждение, вызванное в костной стрелке за 1–3 дня до отбора проб, тогда как время жизни NCE у мышей составляет от 0,35 до 50 дней и, таким образом, может использоваться для выявления повреждений, вызванных в костном мозге за этот период времени.Этот подход особенно полезен, поскольку ретроспективные анализы могут проводиться на синеарах периферической крови, подготовленных для гематологической оценки животных, подвергавшихся хроническому или субхроническому воздействию тестируемых химикатов. ал. (1984) получили данные MN на мышах C57B1/6, подвергавшихся воздействию 300 ppm бензола в течение 4, 8 и 16 недель, и взяли образцы через 4, 8 и 16 недель после прекращения каждого воздействия бензола, что позволило предположить, что вызывалось меньшее повреждение костного мозга. с увеличением продолжительности воздействия. Однако этот эксперимент был плохо спланирован для этой цели, и нельзя было сбрасывать со счетов другие возможности, связанные со значительными изменениями в гематополях. Экспериментальный план, использованный в исследовании API, гораздо лучше подходил для решения этого вопроса.
API PUBL 32-32855-1985 История
1985API PUBL 32-32855-1985 ОЦЕНКА ЧАСТОТЫ МИКРОНЯДЕР В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ МУЖЧИН И ЖЕНЩИН МЫШЕЙ CD-1, ХИМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ БЕНЗОЛА В ТЕЧЕНИЕ 90 ДНЕЙ