VDI 4253 Blatt 4-2011 Обнаружение воздушно-капельных микроорганизмов и вирусов в наружном воздухе - определение общего количества клеток с помощью флуоресцентного анализа после окраски DAPI
В настоящем руководстве описан метод оценки количественного определения микроорганизмов путем микроскопического подсчета частиц после окрашивания ДНК-содержащих структур (ДНК@дезоксирибонуклеиновая кислота). Это независимый от выращивания процесс@, который позволяет@ оценивать образцы@, которые, например, B. были собраны в соответствии с рекомендациями VDI 4252, лист 21) и VDI 4252, лист 3 для измерений наружного воздуха или VDI 4257 для измерений выбросов. Благодаря независимому от культивирования анализу регистрируются живые и мертвые микроорганизмы. Использование этого метода обнаружения особенно подходит в тех случаях, когда микроорганизмы особенно подвергаются опасному для жизни воздействию окружающей среды на пути от источника выбросов до места отбора проб, например. B. Воздействие тепла@, радиации@, засухи или механического стресса@, так что микроорганизмы больше не могут культивироваться или, по крайней мере, можно предположить, что их способность к культивированию значительно снижается. Дифференциация микроорганизмов с помощью этого метода невозможна. Использование этого метода требует, чтобы пользователи были способны различать переносимые по воздуху биогенные частицы, такие как бактерии, споры, гифы, пыльца или волоски растений (трихомы), на основе морфологических критериев. Настоящее руководство рассчитано на диапазон концентраций порядка 105 GZZ/м3 (общее число ячеек GZZ ?C) для отбора проб с помощью импинджеров с объемом пробы воздуха 0@5 м3. При более низком ожидаемом GZZ требуются большие объемы отбора проб воздуха@, чего можно достичь с помощью процессов фильтрации с поликарбонатными фильтрами1) (см. Таблицу 2@ Раздел 9.4). 1) Для отбора проб согласно VDI 4252, лист 2, предусматривает комбинацию фильтров из желатина и поликарбоната. Однако желатиновые фильтры или комбинация желатиновых/поликарбонатных фильтров не могут быть оценены с использованием метода, описанного в данном руководстве, из-за сильной фоновой флуоресценции желатина и сложности фильтрации. По этой причине процедура анализа DAPI должна быть соответствующим образом изменена и для отбора проб следует использовать только поликарбонатный фильтр, при необходимости с опорным фильтром. Если поликарбонатный фильтр используется без желатинового фильтра, культивирование в соответствии с VDI 4253 часть 2 не предусмотрено. Модифицированный процесс фильтрации с использованием поликарбонатных фильтров не прошел валидацию в отношении культивирования согласно VDI 4253, лист 2. @ пригодность должна быть подтверждена путем определения параметров процесса.
VDI 4253 Blatt 4-2011 История
2013VDI 4253 Blatt 4-2013 Биоаэрозоли и биологические агенты. Определение общего количества клеток методом флуоресцентного анализа после окрашивания DAPI.
2011VDI 4253 Blatt 4-2011 Обнаружение воздушно-капельных микроорганизмов и вирусов в наружном воздухе - определение общего количества клеток с помощью флуоресцентного анализа после окраски DAPI