GB/T 33526-2017
Метод обнаружения генетически модифицированных организмов методом цифровой ПЦР (Англоязычная версия)

Стандартный №

GB/T 33526-2017

язык

Китайский, Доступно на английском

Дата публикации

2017

Разместил

General Administration of Quality Supervision, Inspection and Quarantine of the People‘s Republic of China

Последняя версия

GB/T 33526-2017

сфера применения

Государственный стандарт Китайской Народной Республики GB/T 33526—2017

Метод цифровой ПЦР-детекции генетически модифицированных растительных продуктов

История создания и значение стандарта

В связи с быстрым развитием генетически модифицированных (ГМ) технологий точное обнаружение ГМ-компонентов стало важнейшим средством обеспечения безопасности пищевых продуктов и устойчивого развития сельского хозяйства. Этот стандарт был предложен и координировался Национальным техническим комитетом по стандартизации биохимических испытаний, а его основными организациями-разработчиками являются Китайская академия инспекции и карантина, Технический центр инспекции и карантина Бюро инспекции и карантина въезда-выезда провинции Гуанси и другие.

Этот стандарт применяется к цифровому ПЦР-обнаружению ГМ-компонентов в ГМ-растениях и их продуктах, включая кукурузу, сою, рапс, рис, картофель, люцерну и хлопок. Его минимальный предел обнаружения составляет 0,1% (массовая доля), что обеспечивает высокую чувствительность и точность.

Принципы и классификация технологии цифровой ПЦР

Цифровая ПЦР (цПЦР) — это революционная технология амплификации нуклеиновых кислот. Ее основной принцип заключается в разделении исходной системы реакции ПЦР на несколько независимых небольших реакционных систем для амплификации и детекции.

Классификация	Цифровая ПЦР на основе чипа	Цифровая ПЦР на основе капель
Метод разделения	Достигается с помощью микрофлюидного чипа, обеспечивает высокую стабильность и однородность.	Достигается за счет формирования структуры «масло в воде», обеспечивает быструю скорость реакции и низкую стоимость, но имеет низкую стабильность.
Преимущества	Высокая стоимость эксперимента, но высокая точность данных.	Низкая стоимость эксперимента и относительно низкие требования к анализу данных.
Применимые сценарии	Подходит для высокоточного и стабильного обнаружения.	Подходит для быстрого скрининга и предварительного обнаружения.

---

Сравнение фреймворков методов цифровой ПЦР-детекции

В этом стандарте разрабатываются специфические праймеры и зонды для универсальных элементов скрининга CaMV35s промотора и терминатора NOS с использованием цифровой ПЦР для амплификации и идентификации компонентов экзогенного элемента скрининга. Этот метод применим как к чиповой цифровой ПЦР, так и к капельной цифровой ПЦР-платформам.

Цель обнаружения	Требования к реагентам	Реакционная система
Ген промотора CaMV35s	Используйте специфические праймеры p35s-F/p35s-R и зонд p35s-P.	См. таблицу 1 для получения информации о конкретной реакционной системе. Конечные концентрации составляют 0,45 мкмоль/л, 0,45 мкмоль/л и 0,1 мкмоль/л соответственно.
Ген терминатора NOS	Используйте специфические праймеры TNOS-F/TNOS-R и зонд TNOS-P.	Реакционная система такая же, как указано выше, но компоненты и объем необходимо скорректировать в соответствии с конкретной платформой, чтобы гарантировать неизменность конечной концентрации.

---

Рекомендации по внедрению

Для обеспечения точности и согласованности результатов теста рекомендуется:

• Строго соблюдать стандартные требования к отбору и подготовке образцов.
• Выбирать подходящую платформу цифровой ПЦР и настраивать реакционную систему в соответствии с инструкциями.
• Расширять возможности анализа данных, особенно совместный анализ между различными платформами.
• Создать стандартизированную систему обучения для повышения профессионального уровня операторов.