ASTM F3294-18 Стандартное руководство по проведению количественных измерений интенсивности флуоресценции в клеточных анализах с помощью широкопольной эпифлуоресцентной микроскопии

Стандартный №: ASTM F3294-18
Дата публикации: 2018
Разместил: American Society for Testing and Materials (ASTM)
Последняя версия: ASTM F3294-18

сфера применения: 1.1 Настоящий руководящий документ был разработан для облегчения сбора микроскопических изображений с помощью эпифлуоресцентного микроскопа, которые позволяют проводить количественные измерения флуоресценции из изображений. Документ предназначен для клеточных биологов, которые часто используют методы флуоресцентного окрашивания для визуализации компонентов экспериментальной системы на основе клеток. Количественное сравнение данных интенсивности, доступных на этих изображениях, возможно только в том случае, если изображения являются количественными и основаны на правильном экспериментальном планировании и соответствующей работе цифрового матричного детектора, такого как устройство с зарядовой связью (CCD) или научный дополнительный металлооксидный полупроводник (sCMOS). ) или аналогичную камеру. Рассмотрены вопросы, связанные с настройками программного обеспечения матричного детектора и контроллера, включая сбор изображений темнового счета для оценки смещения, коррекцию плоского поля, коррекцию фона, эталонное тестирование лампы возбуждения и люминесцентной собирающей оптики. 1.2 Этот документ разработан для эпифлуоресцентной микроскопии, но вполне вероятно, что многие из обсуждаемых здесь вопросов применимы и к количественной визуализации в других системах флуоресцентной микроскопии, таких как флуоресцентная конфокальная микроскопия. Это руководство разработано на основе одноцветной флуоресцентной микроскопии или многоцветной визуализации, при которой измеренная флуоресценция спектрально хорошо разделена. 1.3 Интенсивность флуоресценции является относительным измерением и сама по себе не имеет соответствующей единицы измерения СИ. В этом документе обсуждаются вопросы метрологии, связанные с относительными измерениями и экспериментальными планами, которые могут потребоваться для обеспечения сопоставимости количественных измерений флуоресценции после изменения конфигурации микроскопа, образца и лампы. 1.4 Настоящий стандарт не претендует на решение всех проблем безопасности, если таковые имеются, связанных с его использованием. Пользователь настоящего стандарта несет ответственность за установление соответствующих мер безопасности, охраны труда и окружающей среды, а также определение применимости нормативных ограничений перед использованием. 1.5 Настоящий международный стандарт был разработан в соответствии с международно признанными принципами стандартизации, установленными в Решении о принципах разработки международных стандартов, руководств и рекомендаций, выпущенном Комитетом Всемирной торговой организации по техническим барьерам в торговле (ТБТ).

ASTM F3294-18 Ссылочный документ

ASTM E131 Стандартные определения терминов и символов, относящихся к молекулярной спектроскопии
ASTM E2186 Стандартное руководство по определению одноцепочечного повреждения ДНК в эукариотических клетках с помощью анализа Comet*， 2023-10-28 Обновление
ASTM E2642 Стандартная терминология для детекторов научных приборов с зарядовой связью (CCD)*， 2021-09-01 Обновление
ASTM E2719 Стандартное руководство по флуоресценции — калибровка и квалификация прибора*， 2022-11-01 Обновление
ASTM E2825 Стандартное руководство по судебно-медицинской обработке цифровых изображений*， 2021-10-01 Обновление
ASTM E284 Стандартная терминология внешнего вида
ASTM F2944 Стандартная практика автоматического анализа колониеобразующих единиц (КОЕ) — метод получения изображений и анализа для подсчета и характеристики клеток и колоний в культуре*， 2020-04-01 Обновление
ASTM F2997 Стандартная практика количественного определения отложений кальция в остеогенной культуре клеток-предшественников с использованием анализа флуоресцентных изображений*， 2023-10-28 Обновление
ASTM F2998 Руководство по использованию флуоресцентной микроскопии для количественной оценки площади распространения фиксированных клеток*， 2023-10-28 Обновление
ISO 13653 Оптика и фотоника. Общие методы оптических испытаний. Измерение относительной освещенности в поле изображения.*， 2019-05-14 Обновление

ASTM F3294-18 История

2018 ASTM F3294-18 Стандартное руководство по проведению количественных измерений интенсивности флуоресценции в клеточных анализах с помощью широкопольной эпифлуоресцентной микроскопии