GB/T 38483-2020
Определение антибактериальной активности микробных вторичных метаболитов — метод зоны ингибирования. (Англоязычная версия)

Стандартный №

GB/T 38483-2020

язык

Китайский, Доступно на английском

Дата публикации

2020

Разместил

General Administration of Quality Supervision, Inspection and Quarantine of the People‘s Republic of China

Последняя версия

GB/T 38483-2020

сфера применения

Анализ стандартной технической структуры

Основные элементы	Требования GB/T 38483-2020	Сравнение традиционных методов
Выбор штамма	Стандартный штамм ATCC (Staphylococcus aureus + Escherichia coli)	Лабораторные бактерии, хранящиеся самостоятельно
Среда для культивирования	Твёрдая/жидкая среда LB (pH7,0±0,2)	Смешивание нескольких формул
Основное оборудование	Прибор для измерения зоны ингибирования (точность 0,1 мм) + чашка Оксфорда	Ручное измерение штангенциркулем

---

Углубленный анализ технических принципов

На основе метода диффузии в агар, путем измерения диаметра зоны ингибирования, образованной диффузией аналита в твердой питательной среде, была построена кривая зависимости концентрации от скорости ингибирования для расчета значения IC₅₀. Стандарт конкретно предусматривает:

• Необходимо установить пять градиентов концентрации (включая точки ингибирования >50% и <50%)
• IC₅₀
рассчитывается с использованием анализа регрессии вероятностных значений (Y=aX+b)
• Абсолютная разница параллельных экспериментов составляет ≤15%

---

Критические контрольные точки экспериментальной операции

Типичный случай применения

Когда в лаборатории тестировали метаболиты Streptomyces, было обнаружено, что при использовании спектрофотометра для контроля OD₆₀₀ бактериальной суспензии при 0,6 повторяемость измеренного IC₅₀ улучшилась на 22% по сравнению с ручным турбидиметрическим методом, который соответствует пределу отклонения в 15%, требуемому стандартом.

Этапы работы	Технические моменты	Распространённые проблемы
Активация штамма	≤10 поколений субкультуры + ежемесячная система контроля	Деградация штамма
Подготовка планшета	55℃ смешанные бактерии + 15 мл/планшет	Неравномерная толщина
Размещение чашки Оксфорда	Слегка надавите, чтобы избежать трещин	Утечка раствора

---

Рекомендации по внедрению стандарта

1. Создайте журнал управления штаммами для записи количества субкультур
2. Регулярная калибровка class='instrument'>прибора для измерения зоны ингибирования и оборудования для контроля температуры
3. Для неполярных образцов рекомендуется использовать Твин-80 в качестве сорастворителя
4. Для обеспечения сопоставимости данных предпочтительны стандартные штаммы ATCC

---

Анализ развития технологий

По сравнению с ранним диско-диффузионным методом, этот стандарт:

• Вводит регрессию значения вероятности для повышения точности расчета IC₅₀
• Определяет требования к значению R² для обеспечения соответствия кривой
• Стандартизирует спецификации чашки Оксфорда (внутренний диаметр 6±0,1 мм)

GB/T 38483-2020 Ссылочный документ

• GB 19489  Лаборатории. Общие требования биобезопасности.
• GB/T 6682  Вода для аналитических лабораторий. Спецификация и методы испытаний.

GB/T 38483-2020 История

• 2020 GB/T 38483-2020 Определение антибактериальной активности микробных вторичных метаболитов — метод зоны ингибирования.

Специальные темы по стандартам и нормам

стандарты и спецификации