SN/T 4708-2016
Двойной метод флуоресцентной ПЦР для обнаружения холерного и мимикусного вибрионов в пограничных портах (Англоязычная версия)

Стандартный №

SN/T 4708-2016

язык

Китайский, Доступно на английском

Дата публикации

2016

Разместил

Professional Standard - Commodity Inspection

Последняя версия

SN/T 4708-2016

сфера применения

Анализ стандартной технической структуры

Элементы обнаружения	Vibrio cholerae	Имитаторы вибрионов	Технические сходства
Целевой ген	Ген ompW	Ген vmh	Обнаружение консервативных генов
Мечение зондов	FAM-BHQ1	HEX-BHQ1	Двухканальное флуоресцентное обнаружение
Чувствительность	≥102 Дизайн нескольких праймеров: Специфические наборы праймеров для гена ompW Vibrio cholerae (канал FAM) и гена vmh имитаторов Vibrio (канал HEX) Оптимизация системы реакции: Система объемом 20 мкл содержит 10 мкл Premix Ex TaqTM, а температура отжига равномерно установлена на уровне 60 ℃ Критерии интерпретации: Значение Ct ≤35 является положительным, 36–40 требует повторного тестирования, а >40 считается отрицательным Ключевые моменты для внедрения биологической безопасности Согласно требованиям GB19489-2008, весь процесс тестирования должен проводиться в боксе биологической безопасности: Транспортировка образцов должна соответствовать положениям Приказа № 45 Министерства здравоохранения Утилизация отходов должна быть стерилизована под высоким давлением (121 ℃, 30 мин) В положительном контроле используют инактивированные штаммы или синтетические фрагменты ДНК Анализ технологической эволюции По сравнению с традиционным методом культивирования (который занимает 3-5 дней) этот стандарт имеет значительные преимущества: Параметры Традиционный метод Этот стандартный метод Диапазон улучшения Цикл тестирования 72-120 ч 4-6 ч 20-кратное Чувствительность 103 КОЕ/мл 102 копий/мл 10-кратное Специфичность 85-90% 99% Значительно улучшено Рекомендации по внедрению стандарта Ключевые моменты контроля качества Каждая партия экспериментов должна включать положительные и отрицательные контроли Регулярно калибруйте микропипетку (рекомендуется ежеквартальная калибровка) Храните флуоресцентный зонд в темноте при температуре -20 °C План обработки сложных образцов Обработка ингибитором: для образцов со значением Ct более 35 разведите их в соотношении 1:10 для повторного тестирования Концентрация образца воды: 450 мл образца воды необходимо обогатить 50 мл щелочной пептонной воды Предотвращение и контроль перекрестного загрязнения: используйте фильтрующие наконечники и работайте в отдельных области SN/T 4708-2016 Ссылочный документ GB 19489-2008  Лаборатории. Общие требования биобезопасности. WS 233-2002  Общий стандарт биобезопасности для микробиологических и биомедицинских лабораторий SN/T 4708-2016 История 2016 SN/T 4708-2016 Двойной метод флуоресцентной ПЦР для обнаружения холерного и мимикусного вибрионов в пограничных портах Специальные темы по стандартам и нормам Стандарты обнаружения холерного вибриона ПЦР флуоресцентные вибрионы мультиплексная ПЦР+флуоресценция Переходная флуоресценция и переходная флуоресценция Фермент мультиплексной флуоресцентной ПЦР вибрион Харви ПЦР Флуоресценция флуоресцеина мультиплексная ПЦР несколько флуоресценции Комната для тестирования на холеру Мультиплексная ПЦР и мультиплексная флуоресцентная количественная ПЦР Холерный вибрион Обнаружение вибрионов стандарты и спецификации DBS32/ 004-2014 Быстрое выявление болезнетворных бактерий в продуктах питания для Юношеских Олимпийских игр AWWA WQTC55194 Использование ДНК-микрочипов для идентификации штаммов и видов криптоспоридий © 2025. Все права защищены.