Настоящий стандарт устанавливает метод определения колониеобразующих единиц (КОЕ) дрожжей и плесени методом заливки чашек после обработки сухой целлюлозы, бумаги и картона с помощью высокоскоростного дезинтегратора. Ключевые параметры обнаружения включают в себя:
| Параметр | Требование | На основе пункта |
|---|---|---|
| Среда культивирования | Агар Сабуро с декстрозой и хлорамфениколом (SDCA) | 5,3 |
| Температура культивирования | 25±1℃ | 9,3 |
| Время культивирования | 3-5 дней | 10 |
| Предел обнаружения | 10 КОЕ/г | 9.2.2 |
В соответствии со стандартами отбора проб ISO 186 и ISO 7213 удалите слой поверхностного загрязнения и получите репрезентативный образец размером 200 мм × 250 мм. Используйте стерильные ножницы для измельчения образца на фрагменты размером <5 мм и взвесьте 2-3 г для приготовления 1%-ной суспензии волокон.
Ключевыми компонентами питательной среды SDCA являются: 40 г/л глюкозы, 5 г/л пептона животной ткани, 5 г/л триптического перевара казеина и 0,05 г/л хлорамфеникола. pH следует контролировать на уровне 5,6±0,2 (измерено при 25 °C). Рекомендуется добавлять 20 мкл/л Твина 80 для стимуляции высвобождения микроорганизмов.
Для проверки стерильности питательной среды требуется контрольная пластина. Результат подсчета наиболее статистически значим, когда количество колоний составляет 15–150 КОЕ/пластину. Требуется повторное тестирование, когда плесень распространяется и покрывает >1/3 пластины.
Случай 1: Проблема агломерации волокон
В некоторых картонах высокой плотности после диссоциации все еще остаются комки волокон. Можно предпринять следующие меры:
• Увеличить время диссоциации до 5 минут
• Использовать пипетку с широким горлышком (диаметром ≥5 мм)
• Добавить стеклянные шарики для облегчения дисперсии
Случай 2: Быстрый рост плесени
Рекомендуется провести предварительный подсчет на 3-й день культивирования и подтвердить окончательный результат на 5-й день. Для быстрорастущих грибов, таких как Mucor, можно рассмотреть следующее:
• Снижение температуры культивирования до 23 °C
• Использование питательной среды с хлорамфениколом и бенгальским розовым для подавления распространения роста
По сравнению с предыдущей версией, версия 2022 года имеет следующие основные обновления:
1. Уточнены требования к контролю для температуры диссоциации ≤ 45 °C (пункт 8.3)
2. Добавлен Твин 80 в качестве необязательного диспергатора (пункт 5.5)
3. Улучшено размерное описание формулы расчета результата (пункт 11.1)
В соответствии с требованиями главы 12 отчет должен включать:
• Модель диссоциации Используемое оборудование
• Информация о номере партии питательной среды
• Размер пластины (90 мм или 140–150 мм)
• Результаты в сухом/влажном состоянии, выраженные в КОЕ/г
• Любые отклонения от стандартных рабочих инструкций

© 2025. Все права защищены.