BS EN ISO 11816-2:2024
Молоко и молочные продукты. Определение активности щелочной фосфатазы - флуориметрический метод для сыра

Стандартный №

BS EN ISO 11816-2:2024

Дата публикации

2024

Разместил

British Standards Institution (BSI)

Последняя версия

BS EN ISO 11816-2:2024

сфера применения

Анализ основного содержания стандарта

В этой части стандарта описан принцип метода определения активности щелочной фосфатазы (ЩФ) в сыре с использованием метода непрерывной кинетики флуоресценции: с использованием нефлуоресцентного ароматического монофосфатного субстрата 2′-[2-бензотиазолил]-6′-гидроксибензотиазолфосфата, он гидролизуется под действием ЩФ с образованием продукта с высокой флуоресценцией, а флуоресценция детектируется с помощью прибора Fluorophos® при температуре 38 °C в течение 3 минут.

---

Технологическое развитие и основные изменения

Версия	BS EN ISO 11816-2:2016	BS EN ISO 11816-2:2024
Требования к прибору	Модель FLM200	Обновление до FLM300 (встроенный нагревательный блок)
Процедура калибровки	Пошаговая процедура	Оптимизация пользовательского интерфейса и электроники
Предел обнаружения	7000 мЕд/кг	Поддержание одинаковой чувствительности

---

Основные рабочие процедуры

Характеристики подготовки образцов

Особые требования к обработке для различных видов сыра:

• Крупный твердый сыр: Возьмите образец толщиной 1 см на 0,5 см ниже корки головки (чтобы избежать неравномерной активности ЩФ в области сердцевины)
• Сыр с мягкой плесенью: Удалите корку, но сохраните подкожный жировой слой
• Полутвердый сыр: Измельчите и перемешайте как обычно

Точки калибровки прибора

Используйте три калибровочных раствора (A:0 мкмоль/л, B:17,24×10⁻³моль/л,

---

Требования к контролю качества

Тип контроля	Критерии качества	Частота
А/Ц тест	302 FLU±4 FLU	Ежедневный запуск
Раствор для контроля прибора	602 FLU±12 FLU	Ежедневное тестирование
Отрицательный контроль	<10 мЕд/кг	На партия

---

Расчет и представление результатов

Формула расчета активности ЩФ:
Ap = (Ap1 × f2 × 25)/m
Где:
Ap1 = активность ЩФ супернатанта (мЕд/л), f2 = коэффициент разбавления, m = масса образца (г)

Требования к точности

• Предел повторяемости: ≤12% от среднего значения (в пределах одной лаборатории)
• Предел воспроизводимости: ≤29% от среднего значения (между лабораториями)

---

Предложения по внедрению

Решение особых ситуаций

Шаги проверки, если значения теста выходят за рамки нормы:

1. Тест на наличие мешающих веществ: используйте калибровочный раствор A для теста. Если показание >20 мЕд/кг, требуется повторный отбор проб.
2. Тест на ЩФ термостойких микроорганизмов: определите остаточную активность после нагревания при 63 °C в течение 30 минут.
3. Высокоактивные образцы: если значение превышает 7000 мЕд/кг, требуется разбавление экстракционным буфером.

Примечание по стандартной области применения

Этот метод не подходит для сыров, содержащих плесень внутри (например, голубого сыра). Особое внимание следует уделить месту отбора проб для крупных твердых сыров, бланшированных при температуре выше 50 °C.