Высокоэффективная жидкостная хроматография основана на классической жидкостной хроматографии, используя жидкость в качестве подвижной фазы. Растворители различной полярности закачиваются в высокоэффективную хроматографическую колонку с неподвижной фазой с чрезвычайно мелкими частицами, где они отделяются и поступают в детектор. используется для обнаружения, тем самым обеспечивая быстрое и высокочувствительное обнаружение образцов. Этот метод использовался для обнаружения и подтверждения гидроксисафлора желтого А в стеблях и листьях сафлора. 7 Этапы определения 7.1 Подготовка образцов Возьмите образцы стеблей и листьев сафлора и измельчите их в многофункциональной дробилке, пропустите через сито с размером ячеек 20 меш и отложите в сторону. 7.2 Приготовление жидкофазного раствора 7.2.1 Приготовление стандартного раствора Точно взвесьте 8 мг стандарта гидроксисафлора желтого А и разбавьте мерную колбу емкостью 10 мл 25% метанолом, чтобы получить 800 мкг/мл стандартного контрольного раствора гидроксисафлора желтого А. 7.2.2 Приготовление раствора испытуемого образца: точно взвешивают 0,5 г просеянного порошка стеблей и листьев сафлора, добавляют 125 мл 57%-ного метанола и экстрагируют при температуре ультразвука 70°C и мощности ультразвука 80 Гц (250 Вт) для 45 мин. К фильтрату добавляют 57% метанола до 125 мл, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм и получают раствор образца стеблей и листьев сафлора 7.3. Для измерения образца возьмите 20 мкл тестируемого раствора, используйте подвижную фазу 0,2% фосфорной кислоты вода (А)-ацетонитрил (Б)-метанол (D), градиентное элюирование: от 0 до 6,5 мин, 80А%-9% B-11% D; 6,5～12,5 мин, 75A%-15%B-10% D, температура колонки 30℃, длина волны 337 нм, скорость потока 1,0 Введите образец при условии мл/мин и повторите измерение три раза. 7.4 Построение стандартной кривой: Возьмите соответствующее количество стандартного эталонного вещества гидроксисафлора желтого (0,8 мг/мл), приготовьте стандартный раствор с концентрациями 800, 400, 200, 100, 50, 25, 12,5 мкг/мл соответственно и добавьте их в подвижной фазе Это 0,2% фосфорная кислота вода (А)-ацетонитрил (Б)-метанол (D), градиентное элюирование: 0 ~ 6,5 мин, 80А%-9%В-11% Д; 6,5-12,5 мин, 75А%-15%В-10% Д; температура колонки: 30°С, длина волны: 337 нм, скорость потока: 1,0 мл/мин. Массовую концентрацию, соответствующую площади, использовали для построения стандартной кривой гидроксисафлора желтого А. 8. Расчет результатов. Используйте значение площади пика (Y) в качестве оси ординат и объем инъекции эталонного вещества (X) в качестве оси абсцисс, чтобы построить стандартную кривую. Уравнение регрессии гидроксисафлора желтого A: Y=2058,83605X-. 6,1580135, r2 =0,99981, измеренная доля гидроксисафлора желтого А в экстракте стебля и листьев сафлора равна 0.
T/NXSLX 0907-2024 История
2024T/NXSLX 0907-2024 Стандарт для определения содержания гидроксисафлора желтого А в стеблях и листьях сафлора