Анализ стандартной технической структуры
| Технические модули | Основные требования | Инновации |
| Сбор образцов | Упаковка дубликатов образцов, стандартизированная маркировка и нумерация | Начальный стандарт классификации для деривативов кожи |
| Извлечение ДНК | Выбор из 6 методов извлечения | Четкое применение метода магнитных частиц в образцах следов |
| Методы обнаружения | 4 категории и 7 технических paths | Введение количественных стандартов цифровой ПЦР |
Ключевые рабочие моменты
1. Характеристики обработки образцов
В стандарте инновационно продукты дикой природы делятся на девять категорий: кости/зубы (≥0,2 г костного порошка), волосы и перья (≥1 шт.), а также шкуры и меха (≥1 см²). Меры предосторожности при предварительной обработке для каждого типа образцов включают:
- Костную ткань следует промыть 2-3 раза 75% этанолом перед измельчением
- Высушенные шкуры и меха следует замочить в буфере для удаления поверхностного слоя
- Свежие образцы мышечной ткани можно измельчать напрямую
2. Оценка качества ДНК
Используется четырехступенчатый механизм проверки:
- Спектрофотометрия (GB/T 34796)
- Электрофорез (Приложение A)
- Значение Ct для обнаружения qPCR
- Количественная оценка флуориметром
Сравнение методов обнаружения
Матрица выбора технологии ПЦР
| Метод | Чувствительность | Применимые сценарии | Критерии интерпретации |
| Универсальное секвенирование праймеров | Среда | Неизвестный вид Скрининг | Идентичность последовательности ≥99% |
| Специфическая амплификация праймера | Высокая | Подтверждение целевого вида | Соответствие размера продукта |
| Метод зондирования qPCR | Сверхвысокая | Детекция микрообразцов | Значение Ct <35 |
Рекомендации по внедрению в лабораторию
Система предотвращения и контроля загрязнения
- Управление зоной: Настройте зону предварительной обработки, зону экстракции и зону амплификации
в соответствии с - процессом LY/T 2501 Мониторинг: Настройте пустой контроль и положительный контроль
для каждой партии - Калибровка оборудования: ПЦР-инструмент требует регулярной калибровки температуры
Ключевые моменты технической проверки
- Новые праймеры должны быть проверены по базе данных BOLD/GenBank
- Для секвенирования всего генома требуется покрытие ≥ 5X
- Предложение для сложных образцов: Мультигенное совместное тестирование
Стандартный эволюционный анализ
По сравнению с LY/T 2501-2015, этот стандарт имеет три основных достижения:
- Новые добавленные цифровая ПЦР технические характеристики
- Уточненные стандарты отбора проб производных кожи
- Преодолен порог суждения 99% идентичности последовательностей